Kobberpeptidet AHK-Cu i celleforskning
AHK-Cu forbinder det korte tripeptid AHK med divalent kobber i et stabilt kompleks. I dermatologisk og hårforskning fungerer det som en defineret kobberbærer til at kortlægge signalveje i fibroblaster, keratinocytter og follikelceller in vitro. Eurolabs leverer peptidet som lyofiliseret pulver i en æske med 10 hætteglas og 100 mg pr. hætteglas. For at købe AHK-Cu får laboratoriet kobbertripeptidet til hudmodeller med 100 mg pr. hætteglas.
Virkningsmekanisme
Kobberpeptider som AHK-Cu tilfører biotilgængeligt kobber til cellekulturer og påvirker enzymer i den ekstracellulære matrix, herunder lysyloxidase og matrixmetalloproteinaser. I fibroblastassays undersøges det, hvordan komplekset styrer kollagen I-ekspression, prolinhydroxylering og cellemigration. I hårfolliklen gælder interessen samspillet med vækstfaktorer og redoxtilstanden i bulgeceller. AHK-Cu fungerer som reference stof til sammenlignelig måling af kobberafhængig transkription og signalveje via TGF-beta og MAPK.
Anvendelse in vitro
Laboratorier anvender AHK-Cu i monolagskulturer af humane dermale fibroblaster for at aflæse kollagen- og elastinmarkører med qPCR eller Western blot. Tredimensionelle hudmodeller og hårfollikelorganoider giver strukturelle aflæsninger som fibertæthed og follikellængde ved definerede koncentrationstrin. Forsøg med kobberfrigivelse sammenligner AHK-Cu med andre kobberkelatorer ud fra cellulært kobberindhold. Fortyndingsrækker fra lyofilisatet understøtter koncentration-responskurver i migrations- og proliferationsassays.
- Fibroblaster: kollagen I, prolinhydroxylering, migration
- Hårfollikelmodeller: bulgeveje, samstimulering med vækstfaktor
- Matrixassays: lysyloxidaseaktivitet, MMP-profiler
- Kobbersporing: cellulært kobberoptag over for referencekelatorer
Specifikation
| Betegnelse | AHK-Cu (alanin-histidin-lysin-kobberkompleks) |
| Sekvens | Tripeptid AHK, Cu(II)-kompleks |
| Form | Lyofiliseret pulver |
| Mængde pr. hætteglas | 100 mg |
| Æskens indhold | 10 hætteglas, 1000 mg i alt |
| Renhed | ≥99 % (HPLC) |
Rekonstitution og håndtering
Lyofilisatet rekonstitueres i laboratoriet med et egnet sterilt opløsningsmiddel. Opløsningsmidlet tilsættes langsomt langs karvæggen og blandes derefter forsigtigt, indtil der ikke er synlige partikler tilbage. Kobberpeptider i opløsning er mere følsomme over for oxidation og lys, derfor føres præparatet hurtigt ind i assays og holdes væk fra direkte lys indtil da. Slutkoncentration og volumen fastsættes i laboratoriets protokol.
Kvalitet og analytik
Hver batch testes med HPLC for en renhed på ≥99 %. Identitetstesten bekræfter AHK-sekvensen og kobberkomplekseringen. Resultaterne dokumenteres pr. batch og gælder hætteglasset på 100 mg i æsken med 10 hætteglas. Dette analytiske grundlag understøtter reproducerbare serier i fibroblast- og follikelforsøg samt sammenligning mellem laboratoriekørsler.