Specifikation
| Betegnelse | VIP (vasoaktivt intestinalt peptid) |
| Sekvens | Naturligt peptid med 28 aminosyrer |
| Molekylvægt | ≈3,33 kDa |
| Form | Lyofiliseret pulver |
| Styrke pr. hætteglas | 10 mg |
| Æskens indhold | 10 hætteglas med identisk styrke |
| Renhed | ≥99 % (HPLC) |
VPAC-receptorer og cAMP-vejen
VIP er et endogent neuropeptid med 28 aminosyrer, som forskningen karakteriserer gennem receptorerne VPAC1 og VPAC2. Begge undertyper hører til sekretin-familien af G-proteinkoblede receptorer og kobler via Gs. Agonistbinding hæver cytoplasmatisk cAMP og aktiverer proteinkinase A. VIP og PACAP deler en del af denne receptorprofil, derfor kører bindings- og funktionsassays ofte begge ligander parallelt. I modeller af tyndtarm, nerve og immunceller udtrykker linjer VIP-receptorer i forskellig tæthed. Det syntetiske peptid spejler disse kaskader i kontrollerede in vitro-systemer og fungerer som referenceagonist for adenylatcyklaseaktivitet og efterfølgende genekspression. Laboratorier, der vil købe VIP, vælger det vasoaktive intestinale peptid med 10 mg pr. hætteglas.
Rekonstitution og håndtering
Lyofiliseret VIP-pulver rekonstitueres i laboratoriet med et egnet sterilt opløsningsmiddel. Opløsningsmidlet tilsættes langsomt langs karvæggen, hvorefter præparatet blandes nænsomt, indtil peptidet er helt opløst. I opløsning er VIP mere følsomt over for omgivelserne, så det videre arbejde sker uden ophold. Indtil brug holdes reagensen væk fra direkte lys. Koncentration og volumen fastlægger laboratoriet i sin egen protokol. Denne beskrivelse fastsætter ingen faste fortyndingsvolumener.
In vitro-anvendelser
I in vitro-forskning er VIP referenceliganden i kompetitive bindingsassays på VPAC1 og VPAC2 og i cAMP-akkumuleringsassays, der kvantificerer agonistpotens over for andre ligander i sekretin-familien. Neuronale og gliale kulturer bruger VIP til at følge synkroniserede cellesvar, neuroprotektionssignaler og frigivelse af inflammatoriske mediatorer efter peptidstimulering. Immun- og epitelcellemodeller bruger VIP til at følge MAPK- og cAMP-afhængige aflæsninger. God opløselighed efter rekonstitution letter definerede fortyndingsrækker til koncentration-responskurver i second messenger- og reportergenassays.
Kvalitet og analyse
Hvert batch prøves med HPLC for peptidindhold og renhed. Renheden ligger på ≥99 %. Et identitetstjek bekræfter molekylets rygrad med 28 aminosyrer. Resultaterne dokumenteres pr. batch og gælder den tilbudte styrke på 10 mg. Den analytiske profil giver et fast grundlag for reproducerbare bindingsdata og parallelle cAMP-måleserier i laboratoriet.