Specificazione
| Denominazione | VIP (peptide intestinale vasoattivo) |
| Sequenza | Peptide naturale di 28 amminoacidi |
| Peso molecolare | ≈3,33 kDa |
| Forma | Polvere liofilizzata |
| Dosaggio per flaconcino | 10 mg |
| Contenuto della scatola | 10 flaconcini di dosaggio identico |
| Purezza | ≥99 % (HPLC) |
Recettori VPAC e via del cAMP
Il VIP è un neuropeptide endogeno di 28 amminoacidi, caratterizzato nella ricerca attraverso i recettori VPAC1 e VPAC2. Entrambi i sottotipi appartengono alla famiglia della secretina dei recettori accoppiati a proteine G e accoppiano tramite Gs. Il legame dell'agonista alza il cAMP citoplasmatico e attiva la proteina chinasi A. VIP e PACAP condividono parte di questo profilo recettoriale, perciò i saggi di legame e di funzione fanno spesso correre i due ligandi in parallelo. Nei modelli di intestino tenue, nervo e cellule immunitarie le linee esprimono i recettori del VIP a densità diverse. Il peptide sintetico riproduce queste cascate in sistemi in vitro controllati e funge da agonista di riferimento per l'attività dell'adenilato ciclasi e per l'espressione genica a valle. Chi vuole comprare VIP sceglie il peptide intestinale vasoattivo da 10 mg per flaconcino.
Ricostituzione e manipolazione
La polvere liofilizzata di VIP si ricostituisce in laboratorio con un solvente sterile adatto. Il solvente si aggiunge lentamente lungo la parete del recipiente, poi la preparazione si mescola con delicatezza fino a dissoluzione completa del peptide. In soluzione il VIP è più sensibile alle condizioni ambientali, quindi il lavoro prosegue in tempi brevi. Fino all'uso il reagente resta al riparo dalla luce diretta. Concentrazione e volume li stabilisce il laboratorio nel proprio protocollo. Questa descrizione non fissa volumi di diluizione.
Applicazioni in vitro
Nella ricerca in vitro il VIP è il ligando di riferimento nei saggi di legame competitivo su VPAC1 e VPAC2 e nei saggi di accumulo di cAMP rispetto agli altri ligandi della famiglia della secretina. Le colture neuronali e gliali seguono risposte cellulari, segnali di neuroprotezione e il rilascio di mediatori infiammatori. I modelli immunitari ed epiteliali seguono parametri legati a MAPK e a cAMP. La solubilità dopo la ricostituzione agevola serie di diluizione per le curve concentrazione-risposta.
Qualità e analitica
Ogni lotto è controllato in HPLC per contenuto peptidico e purezza. La purezza si attesta a ≥99 %. Un controllo di identità conferma lo scheletro di 28 amminoacidi della molecola. I risultati sono registrati per lotto e valgono per il dosaggio da 10 mg offerto. Questo profilo analitico sostiene dati di legame riproducibili e serie parallele di misura del cAMP in laboratorio.