Spesifikasyon
| Ad | VIP (vazoaktif intestinal peptid) |
| Dizi | Doğal 28 amino asitli peptid |
| Moleküler ağırlık | ≈3,33 kDa |
| Form | Liyofilize toz |
| Flakon başına miktar | 10 mg |
| Kutu içeriği | Aynı miktarda 10 flakon |
| Saflık | ≥99 % (HPLC) |
VPAC reseptörleri ve cAMP yolu
VIP, araştırmada VPAC1 ve VPAC2 reseptörleri üzerinden tanımlanan, 28 amino asitten oluşan endojen bir nöropeptiddir. Her iki alt tip sekretin ailesinin G proteini kenetli reseptörlerindendir ve Gs üzerinden kenetlenir. Agonist bağlanması sitoplazmik cAMP düzeyini yükseltir ve protein kinaz A etkinliğini başlatır. VIP ile PACAP bu reseptör profilinin bir bölümünü paylaşır, bu nedenle bağlanma ve fonksiyon deneyleri iki ligandı çoğu kez paralel yürütür. İnce bağırsak, sinir ve immün hücre modellerinde hatlar VIP reseptörlerini farklı yoğunlukta ifade eder. Sentetik peptid bu sinyal dizilerini kontrollü in vitro sistemlerde yansıtır ve adenilat siklaz etkinliği ile sonraki gen ifadesi için referans agonist olarak durur. VIP satın almak isteyenler flakon başına 10 mg vazoaktif intestinal peptidi seçer.
Yeniden çözme ve kullanım
Liyofilize VIP tozu laboratuvarda uygun steril bir çözücü ile yeniden çözülür. Çözücü kap duvarı boyunca yavaşça eklenir, ardından peptid tamamen çözünene kadar hazırlık nazikçe karıştırılır. Çözelti halinde VIP çevre koşullarına daha duyarlıdır, bu yüzden sonraki işlem kısa sürede yapılır. Kullanıma kadar reaktif doğrudan ışıktan uzak tutulur. Derişim ve hacmi yürüten laboratuvar kendi protokolünde belirler. Bu metin sabit seyreltme hacimleri vermez.
In vitro uygulamalar
In vitro araştırmada VIP, VPAC1 ve VPAC2 üzerinde yarışmalı bağlanma deneylerinin ve diğer sekretin ailesi ligandlarına karşı agonist gücünü ölçen cAMP birikim deneylerinin referans ligandıdır. Nöronal ve glial kültürler, peptid uyarısından sonra eşzamanlı hücre yanıtlarını, nöroproteksiyon sinyallerini ve enflamatuvar medyatör salınımını izlemek için VIP kullanır. İmmün ve epitel hücre modelleri MAPK ve cAMP bağımlı okumaları takip etmek için VIP kullanır. Liyofilizatın yeniden çözme sonrası iyi çözünürlüğü, ikinci haberci ve raportör gen deneylerinde derişim-yanıt eğrileri için tanımlı seyreltme serilerini kolaylaştırır.
Kalite ve analitik
Her parti, peptid içeriği ve saflık açısından HPLC ile incelenir. Saflık ≥99 % düzeyindedir. Kimlik kontrolü molekülün 28 amino asitli iskeletini doğrular. Sonuçlar parti bazında kaydedilir ve sunulan 10 mg miktarı için geçerlidir. Bu analitik profil, laboratuvarda tekrarlanabilir bağlanma verileri ve paralel cAMP ölçüm serileri için sağlam bir zemin oluşturur.