Specifikace
| Označení | Epithalon (Epitalon, AEDG) |
| Sekvence | Ala-Glu-Asp-Gly (tetrapeptid) |
| Molekulová hmotnost | ≈390 Da |
| Forma | Lyofilizovaný prášek |
| Síla na lahvičku | 10 mg |
| Obsah balení | 10 lahviček se stejnou silou (celkem 100 mg) |
| Čistota | ≥99 % (HPLC) |
Mechanismus účinku
Epithalon je syntetický tetrapeptid, který se ve výzkumu zkoumá především v souvislosti s biologií telomer a buněčným stárnutím. Telomery chrání konce chromozomů a jejich zkracování v průběhu buněčných dělení koreluje v modelech s replikativní senescencí. Telomeráza, mimo jiné prostřednictvím podjednotky hTERT, může prodlužovat telomerovou DNA. V buněčných a tkáňových modelech se Epithalon používá k charakterizaci vztahu mezi peptidovými signály, aktivitou telomerázy a stabilitou délky telomer. Laboratoře, které chtějí koupit Epithalon, získají tetrapeptid v množství 10 mg na lahvičku.
Rekonstituce a zacházení
Lyofilizát se v laboratoři rekonstituuje vhodným sterilním rozpouštědlem. Rozpouštědlo se přidává pomalu podél stěny nádoby a přípravek se šetrně míchá, dokud se prášek zcela nerozpustí. Díky krátké sekvenci se Epithalon obvykle rozpouští rychle. Vzniklý roztok se brzy zpracuje, protože peptidy v roztoku citlivěji reagují na vlivy okolí. Do použití se činidlo chrání před přímým světlem. Koncentraci a objem stanoví laboratoř ve vlastním protokolu.
Výzkum in vitro
Ve výzkumu in vitro slouží Epithalon jako definovaný referenční peptid pro studie stárnutí a dlouhověkosti na buněčných liniích. Typické koncové body jsou aktivita telomerázy, exprese hTERT, délka telomer pomocí qPCR nebo analýzy TRF a markery senescence jako p16 nebo SA-β-Gal. Kultury fibroblastů a epitelových buněk se často používají k porovnání replikačních limitů a stresem navozených drah stárnutí. Epithalon lze zařadit do definovaných ředicích řad a v kontrolovaných testech ověřovat na dávce závislé účinky na parametry telomer a buněčného cyklu.
Kvalita a analytika
Každá šarže Epithalonu se zkoumá pomocí HPLC na čistotu a obsah činí ≥99 %. Kontrola identity potvrzuje sekvenci tetrapeptidu Ala-Glu-Asp-Gly. Výsledky se dokumentují po šaržích. Tato analytická charakterizace podporuje reprodukovatelné experimenty in vitro, když se parametry telomer a senescence porovnávají mezi sériemi měření.