Koperpeptide AHK-Cu in celonderzoek
AHK-Cu verbindt het korte tripeptide AHK met tweewaardig koper tot een stabiel complex. In onderzoek naar huid en haar dient het als gedefinieerde koperdrager om signaalroutes in fibroblasten, keratinocyten en follikelcellen in vitro te karakteriseren. Eurolabs levert het peptide als gelyofiliseerd poeder in een doos met tien flacons van 100 mg per flacon. Wie AHK-Cu kopen wil, krijgt het kopertripeptide met 100 mg per flacon.
Werkingsmechanisme
Koperpeptiden zoals AHK-Cu geven biobeschikbaar koper af aan celkweken en beïnvloeden enzymen van de extracellulaire matrix, waaronder lysyloxidase en matrixmetalloproteïnasen. In assays met fibroblasten wordt nagegaan hoe het complex de expressie van collageen I, de prolinehydroxylering en de celmigratie stuurt. Aan de haarfollikel onderzoeken laboratoria de wisselwerking met groeifactoren en de redoxstatus van de bulgecellen. AHK-Cu is de referentiestof waarmee koperafhankelijke transcriptie en signaalroutes via TGF-β en MAPK vergelijkbaar worden gemeten.
Gebruik in vitro
Laboratoria gebruiken AHK-Cu in monolaagculturen van humane dermale fibroblasten om markers voor collageen en elastine met qPCR of Western blot uit te lezen. Driedimensionale huidmodellen en haarfollikelorganoïden geven structurele uitlezingen zoals vezeldichtheid en follikellengte bij vastgelegde concentraties. Experimenten naar koperafgifte vergelijken AHK-Cu met andere koperchelatoren aan de hand van cellulaire Cu-gehalten. Verdunningsreeksen uit het lyofilisaat ondersteunen concentratie-responscurven in migratie- en proliferatieassays.
- Fibroblasten: collageen I, prolinehydroxylering, migratie
- Haarfollikelmodellen: signaalroutes in de bulge, costimulatie met groeifactoren
- Matrixassays: activiteit van lysyloxidase, MMP-profielen
- Kopertracer: cellulaire Cu-opname tegen referentiechelatoren
Specificatie
| Naam | AHK-Cu (alanine-histidine-lysine-kopercomplex) |
| Sequentie | Tripeptide AHK, gecomplexeerd met Cu(II) |
| Vorm | Gelyofiliseerd poeder |
| Sterkte per flacon | 100 mg |
| Inhoud van de doos | 10 flacons, 1000 mg totaal |
| Zuiverheid | ≥99 % (HPLC) |
Reconstitutie en hantering
Het lyofilisaat wordt in het laboratorium gereconstitueerd met een geschikt steriel oplosmiddel. Het oplosmiddel gaat langzaam langs de binnenwand van de flacon. Daarna wordt voorzichtig gemengd tot er geen zichtbare deeltjes meer zijn. Koperpeptiden in oplossing zijn gevoeliger voor oxidatie en licht, dus de bereiding gaat kort na het mengen de assay in en blijft tot die tijd beschermd tegen directe lichtinval. Eindconcentratie en volume legt het laboratorium vast in het eigen protocol.
Kwaliteit en analyse
Elke batch wordt met HPLC gecontroleerd op een zuiverheid van ≥99 %. De identiteitscontrole bevestigt de AHK-sequentie en de kopercomplexering. De resultaten worden per batch vastgelegd en gelden voor de sterkte van 100 mg per flacon in de doos met tien flacons. Deze analytische basis ondersteunt reproduceerbare meetreeksen in experimenten met fibroblasten en follikels en maakt vergelijking tussen laboratoriumrondes mogelijk.