VIP 10 mg

Specificatie

VPAC-receptoren en de cAMP-signaalroute

VIP is een endogeen neuropeptide van 28 aminozuren dat in onderzoek wordt gekarakteriseerd via de receptoren VPAC1 en VPAC2. Beide subtypen behoren tot de secretinefamilie van G-eiwitgekoppelde receptoren en koppelen via Gs. Agonistbinding leidt doorgaans tot een stijging van cytoplasmatisch cAMP en activering van proteïnekinase A. VIP en PACAP delen deels dezelfde receptorprofielen, waardoor bindings- en functieassays beide liganden vaak parallel inzetten. In modellen van dunne darm, zenuwweefsel en immuuncellen brengen cellijnen VIP-receptoren in verschillende mate tot expressie. Het synthetische peptide weerspiegelt deze signaalcascades in gecontroleerde in-vitrosystemen en dient als referentieagonist voor adenylaatcyclaseactiviteit en daaropvolgende genexpressie. Wie VIP kopen wil, neemt het vasoactieve intestinale peptide met 10 mg per flacon.

Reconstitutie en hantering

Het lyofilisaat wordt in het laboratorium met een geschikt steriel oplosmiddel gereconstitueerd. Het oplosmiddel wordt langzaam langs de wand van het vat toegevoegd. Daarna wordt het preparaat voorzichtig gemengd tot het peptide volledig is opgelost. In opgeloste vorm reageert VIP gevoeliger op omgevingsinvloeden, daarom volgt de verdere verwerking kort daarna. Tot gebruik wordt het reagens tegen rechtstreeks licht beschermd. Concentratie en volume legt het uitvoerende laboratorium vast in het eigen protocol. Deze beschrijving bevat geen vaste verdunningsvoorschriften.

In-vitro-toepassingen

In in-vitro-onderzoek dient VIP als referentieligand in competitieve bindingsassays aan VPAC1 en VPAC2 en in cAMP-accumulatieassays, waarin de agonistpotentie ten opzichte van andere liganden uit de secretinefamilie wordt gekwantificeerd. Neuronale en gliale culturen gebruiken VIP om gesynchroniseerde celreacties, neuroprotectiesignalen en de afgifte van ontstekingsmediatoren na peptidestimulatie te onderzoeken. Immuun- en epitheelcelmodellen zetten VIP in om MAPK- en cAMP-afhankelijke parameters te volgen. De goede oplosbaarheid van het lyofilisaat na reconstitutie vergemakkelijkt gedefinieerde verdunningsreeksen voor concentratie-werkingscurven in second-messenger- en reportergenassays.

Kwaliteit en analyse

Elke charge wordt met HPLC op peptidegehalte en zuiverheid gecontroleerd. De zuiverheid ligt op ≥99 %. Aanvullend bevestigt een identiteitscontrole het peptidegeraamte van 28 aminozuren. De resultaten worden per charge vastgelegd en gelden voor de aangeboden sterkte van 10 mg. Deze analytische karakterisering biedt een betrouwbare basis voor reproduceerbare bindingsgegevens en parallelle cAMP-meetreeksen in het laboratorium.