Peptyd miedziowy AHK-Cu w badaniach komórkowych
AHK-Cu łączy krótki tripeptyd AHK z dwuwartościową miedzią w stabilny kompleks. W badaniach dermatologicznych i włosów służy jako określony nośnik miedzi do charakteryzowania szlaków w fibroblastach, keratynocytach i komórkach mieszka in vitro. Eurolabs dostarcza peptyd jako liofilizowany proszek w pudełku 10 fiolek po 100 mg na fiolkę. Aby kupić AHK-Cu, laboratorium otrzymuje tripeptyd miedziowy do modeli skóry w dawce 100 mg na fiolkę.
Mechanizm działania
Peptydy miedziowe takie jak AHK-Cu dostarczają biodostępnej miedzi do hodowli komórkowych i wpływają na enzymy macierzy zewnątrzkomórkowej, w tym oksydazę lizylową i metaloproteinazy macierzy. W testach fibroblastów bada się, jak kompleks kieruje ekspresją kolagenu I, hydroksylacją proliny i migracją komórek. W mieszku włosowym liczy się oddziaływanie z czynnikami wzrostu oraz stan redoks komórek bulge. AHK-Cu pełni rolę substancji odniesienia do porównywalnego pomiaru transkrypcji zależnej od miedzi oraz szlaków TGF-beta i MAPK.
Zastosowanie in vitro
Laboratoria stosują AHK-Cu w hodowlach jednowarstwowych ludzkich fibroblastów skórnych, aby odczytać markery kolagenu i elastyny metodą qPCR lub Western blot. Trójwymiarowe modele skóry i organoidy mieszków włosowych pozwalają na odczyty strukturalne, takie jak gęstość włókien i długość mieszka przy określonych stopniach stężenia. Doświadczenia uwalniania miedzi porównują AHK-Cu z innymi chelatorami według zawartości miedzi w komórce. Serie rozcieńczeń z liofilizatu wspierają krzywe stężenie-odpowiedź w testach migracji i proliferacji.
- Fibroblasty: kolagen I, hydroksylacja proliny, migracja
- Modele mieszka włosowego: szlaki bulge, kostymulacja czynnikami wzrostu
- Testy macierzy: aktywność oksydazy lizylowej, profile MMP
- Ślad miedzi: komórkowy wychwyt Cu wobec chelatorów odniesienia
Specyfikacja
| Nazwa | AHK-Cu (kompleks miedzi alanina-histydyna-lizyna) |
| Sekwencja | Tripeptyd AHK, kompleks Cu(II) |
| Forma | Proszek liofilizowany |
| Ilość na fiolkę | 100 mg |
| Zawartość pudełka | 10 fiolek, łącznie 1000 mg |
| Czystość | ≥99 % (HPLC) |
Rekonstytucja i postępowanie
Liofilizat rekonstytuuje się w laboratorium odpowiednim sterylnym rozpuszczalnikiem. Rozpuszczalnik dodaje się powoli wzdłuż ścianki naczynia, a następnie delikatnie miesza, aż nie pozostaną widoczne cząstki. Peptydy miedziowe w roztworze są wrażliwsze na utlenianie i światło, dlatego preparat szybko przechodzi do testów i do tego czasu jest chroniony przed bezpośrednim światłem. Stężenie końcowe i objętość ustala protokół laboratorium.
Jakość i analityka
Każdą partię bada się metodą HPLC pod kątem czystości ≥99 %. Test tożsamości potwierdza sekwencję AHK i kompleksowanie miedzi. Wyniki dokumentuje się dla partii i dotyczą fiolki 100 mg w pudełku 10 fiolek. Ta podstawa analityczna wspiera powtarzalne serie w doświadczeniach na fibroblastach i mieszkach oraz porównanie między przebiegami laboratoryjnymi.