Specifikation
| Beteckning | Epithalon (Epitalon, AEDG) |
| Sekvens | Ala-Glu-Asp-Gly (tetrapeptid) |
| Molekylvikt | ≈390 Da |
| Form | Lyofiliserat pulver |
| Styrka per vial | 10 mg |
| Askinnehåll | 10 vialer med identisk styrka (100 mg totalt) |
| Renhet | ≥99 % (HPLC) |
Verkningsmekanism
Epithalon är en syntetisk tetrapeptid som i forskning främst studeras i samband med telomerbiologi och cellulärt åldrande. Telomerer skyddar kromosomändarna, och deras förkortning under successiva celldelningar korrelerar i modeller med replikativ senescens. Telomeras, bland annat via subenheten hTERT, kan förlänga telomer-DNA. I cell- och vävnadsmodeller används Epithalon för att karakterisera sambandet mellan peptidsignaler, telomerasaktivitet och stabiliteten hos telomerlängden. Laboratorier som vill köpa Epithalon får tetrapeptiden med 10 mg per vial.
Rekonstitution och hantering
Lyofilisatet rekonstitueras på laboratoriet med ett lämpligt sterilt lösningsmedel. Lösningsmedlet tillsätts långsamt längs kärlväggen och beredningen blandas varsamt tills pulvret löst sig helt. På grund av den korta sekvensen löser sig Epithalon i regel snabbt. Den färdiga lösningen bearbetas inom kort, eftersom peptider i lösning reagerar lättare på omgivningspåverkan. Fram till användning skyddas reagenset mot direkt ljus. Koncentration och volym fastställs av laboratoriet i det egna protokollet.
In vitro-forskning
I in vitro-forskning tjänar Epithalon som definierad referenspeptid för åldrande- och livslängdsstudier på cellinjer. Typiska ändpunkter är telomerasaktivitet, uttryck av hTERT, telomerlängd med qPCR eller TRF-analys samt senescensmarkörer som p16 eller SA-β-Gal. Fibroblast- och epitelcellkulturer används ofta för att jämföra replikationsgränser och stressinducerade åldrandevägar. Epithalon kan föras in i definierade spädningsserier för att i kontrollerade analyser pröva dosberoende effekter på telomer- och cellcykelparametrar.
Kvalitet och analys
Varje sats av Epithalon kontrolleras med HPLC avseende renhet, och halten ligger på ≥99 %. En identitetskontroll bekräftar tetrapeptidsekvensen Ala-Glu-Asp-Gly. Resultaten dokumenteras per sats. Denna analytiska karakterisering stöder reproducerbara in vitro-experiment när telomer- och senescensparametrar jämförs mellan mätserier.